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关于原代细胞的小知识
浏览次数:78发布日期:2021-06-09

     原代细胞来源于活体或是新近死亡的供体,通过机械或酶方法解离获得,其方案根据来源物种(例如人,小鼠)和所涉及的组织类型而变化。原代培养的一般是从活体组织中获取的细胞,细胞体系比较复杂,不稳定,比如肿瘤组织的原代培养细胞会含有肿瘤细胞、淋巴细胞、血管内皮细胞等等。一般传代的细胞指的是已经趋于稳定的单一细胞系。原代培养一般培养到十代左右,传代培养可以培养至50代,甚至个别细胞发生突变形成类似于癌细胞无线增值,原代培养具有两个特点接触抑制和贴壁生长。最直观的理解,就是不能无限传代下去。

     原代细胞自然生长有两种方式,锚定依赖或非锚定依赖,这主要取决于它们在体内的组织来源:外周血(非锚定依赖)或固体组织器官(锚定依赖)。细胞一旦分离后,24-48h内需要进行贴壁或起始,开始培养。培养通常包含以下步骤:组织切割和切碎,酶解,反复洗涤,研磨和微滤分馏,最后重新悬浮和接种收集的细胞群。对于松散的、被纤维结缔包围的组织,机械均质化可能足以进行解离。
由于与细胞分裂相关的染色体端粒缩短,原代细胞在体外的寿命有限。大约20到60次分裂后,端粒变得太短而无法承受另一个循环,导致细胞分裂停止。这种现象被称为Hayflick极限。

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